自然殺傷（NK）細(xì)胞是體內(nèi)重要的腫瘤殺傷免疫細(xì)胞。NK細(xì)胞對(duì)病毒感染細(xì)胞或腫瘤形成有很快的反應(yīng)率。此外，NK細(xì)胞具有廣泛的抗腫瘤作用，沒(méi)有顯示腫瘤殺傷的特異性和MHC的局限性。當(dāng)其他免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞和B細(xì)胞）功能低下時(shí)，NK細(xì)胞的功能就顯得尤為重要。

目前，基于NK細(xì)胞的腫瘤免疫治療已逐漸被發(fā)現(xiàn)。讓我們看看有哪些策略可用？

它可以單打獨(dú)斗，也可以群毆

NK細(xì)胞是抵抗腫瘤細(xì)胞和病毒感染的第一道防線，它可以直接殺死腫瘤細(xì)胞而無(wú)特異性。NK細(xì)胞可以識(shí)別這些細(xì)胞，在沒(méi)有抗體或MHC的情況下產(chǎn)生快速的免疫反應(yīng)。對(duì)于那些沒(méi)有自我標(biāo)記的MHC-I細(xì)胞，NK細(xì)胞可以在沒(méi)有激活的情況下殺死它們。這種自然殺傷活性不需要抗原增敏、抗體1參與和無(wú)MHC限制。它不同于人體內(nèi)其他類型的白細(xì)胞。它不需要來(lái)自免疫系統(tǒng)的特殊指令，也不需要其他細(xì)胞的合作。它能自行識(shí)別和攻擊外來(lái)細(xì)胞、癌細(xì)胞和病毒。

它除了具有強(qiáng)大的殺滅功能外，還具有強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)功能，與其他免疫細(xì)胞相互作用，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫狀態(tài)和免疫功能。臨床研究發(fā)現(xiàn)，NK細(xì)胞過(guò)繼免疫治療在惡性腫瘤的治療中具有良好的前景，對(duì)多種實(shí)體瘤和血液系統(tǒng)惡性腫瘤有一定的療效。

三種抗癌方法

NK細(xì)胞有三種抗癌作用：

• 通過(guò)釋放孔蛋白、顆粒酶或死亡受體直接殺傷腫瘤細(xì)胞；

• 它們通過(guò)分泌細(xì)胞因子和趨化因子，在免疫系統(tǒng)中起調(diào)節(jié)細(xì)胞的作用，并激活T細(xì)胞的殺傷作用

• ADCC效應(yīng)（抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性）形成。當(dāng)B細(xì)胞發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞時(shí)，它們會(huì)悄悄地在癌細(xì)胞上留下特異性IgG抗體作為標(biāo)記，提醒NK細(xì)胞。當(dāng)NK細(xì)胞看到這個(gè)標(biāo)記物時(shí)，它們會(huì)起到殺戮的作用。

？？圖像來(lái)源：2

目前，國(guó)際上腫瘤免疫治療的NK細(xì)胞策略如下：

• 體外活化NK細(xì)胞（自體或異體）的治療

• 結(jié)合NK細(xì)胞和單克隆抗體（如免疫抑制檢查點(diǎn)抑制劑）誘導(dǎo)抗體特異性細(xì)胞毒性

• car-nk細(xì)胞免疫治療的構(gòu)建

NK細(xì)胞體外活化的治療策略

NK細(xì)胞可通過(guò)自身的表面受體（激活的和抑制的受體）調(diào)節(jié)自身的細(xì)胞毒性。通過(guò)激活NK細(xì)胞自身的受體是解除NK細(xì)胞免疫應(yīng)答的有效途徑。

激活受體途徑的刺激

NK細(xì)胞表面有一系列的激活受體，如天然細(xì)胞毒性受體（NCRs）、C型凝集素（NKG2D）SLAM家族受體和CD16。這些活化受體與配體結(jié)合后，可誘導(dǎo)IFN-γ、TNF-α等細(xì)胞因子的分泌。

IL-15

臨床前和早期資料均顯示IL-15可誘導(dǎo)NK細(xì)胞數(shù)量增加。IL-15一方面有助于跨越免疫關(guān)卡的抑制機(jī)制，另一方面可以改善NK細(xì)胞CD16介導(dǎo)的功能。目前，IL-15已成為免疫治療的新靶點(diǎn)。

CD16

NK細(xì)胞也表達(dá)低親和力受體FCγRIII（CD16）。CD16可與腫瘤抗原特異性抗體FC段結(jié)合，介導(dǎo)NK細(xì)胞識(shí)別和殺傷被抗體包圍的腫瘤細(xì)胞，即ADCC。與其他活化的NK細(xì)胞受體不同，CD16與FC的結(jié)合不需要共活化，可以產(chǎn)生強(qiáng)烈的反應(yīng)。這也使NK細(xì)胞能夠在病毒感染和腫瘤形成的早期通過(guò)抗體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。ADCC是NK細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞的主要途徑。

此外，我們還設(shè)計(jì)了一種以CD16和NKG2D為靶點(diǎn)的雙特異性分子，能夠靶向NK細(xì)胞識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞。（雙特異性分子被設(shè)計(jì)用來(lái)識(shí)別腫瘤抗原，這些抗原激活NK細(xì)胞受體與另一端結(jié)合，從而使NK細(xì)胞殺死過(guò)度表達(dá)這些抗原的腫瘤細(xì)胞。）

結(jié)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑

雖然NK細(xì)胞對(duì)腫瘤的反應(yīng)調(diào)節(jié)并不依賴于對(duì)腫瘤相關(guān)抗原的識(shí)別，但也存在著免疫檢查點(diǎn)的激活或抑制機(jī)制。腫瘤細(xì)胞能表達(dá)NK細(xì)胞免疫檢查點(diǎn)配體，抑制NK細(xì)胞介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞溶解。因此，為了限制這種抑制作用，人們開(kāi)發(fā)了一系列腫瘤NK細(xì)胞免疫抑制檢查點(diǎn)抗體。

阻斷“抑制性受體”途徑

NK細(xì)胞表面表達(dá)多種抑制性受體，如KIR（免疫球蛋白樣受體）C型凝集素受體（nkg2a）中常見(jiàn)的免疫檢查點(diǎn)受體PD-1、Tim-3、LAG-3、tigit等，它們能與MHCⅠ類分子結(jié)合，抑制NK細(xì)胞的活化。

體外實(shí)驗(yàn)表明，iph2102單抗阻斷kir2dl1-3可提高NK細(xì)胞的抗腫瘤活性。它可以通過(guò)抑制NK細(xì)胞的KIRs對(duì)不識(shí)別MHCⅠ類表達(dá)的轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。此外，針對(duì)NK細(xì)胞相應(yīng)抑制性受體的抗體能顯著提高NK細(xì)胞的殺傷效果。

此外，研究人員還檢測(cè)了多發(fā)性骨髓瘤患者NK細(xì)胞PD1的表達(dá)。PD1 MAb（ct-011）的應(yīng)用可以修復(fù)NK細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤作用，此外，pdl1igg1mab的應(yīng)用還可能刺激NK細(xì)胞的ADCC。

其中，AndréP等人。研制了抗NK細(xì)胞抑制受體nkg2a的人源化抗體monalizumab，并對(duì)其在體外對(duì)多種腫瘤細(xì)胞系（包括HNSCC細(xì)胞系和小鼠體內(nèi)）的作用進(jìn)行了評(píng)價(jià)。發(fā)現(xiàn)當(dāng)與其他單克隆抗體如DurvutAb（抗PD1單克隆抗體）或EGFR單克隆抗體和西妥昔單抗一起使用時(shí)，它具有加性效應(yīng)。

結(jié)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑和其他NK定向免疫療法，它可用于靶向各種類型的腫瘤，這些腫瘤目前對(duì)現(xiàn)有療法無(wú)反應(yīng)。

汽車nk細(xì)胞治療

嵌合抗原受體修飾NK細(xì)胞能顯著提高NK細(xì)胞的療效和特異性，其原理是通過(guò)在NK細(xì)胞表面構(gòu)建嵌合腫瘤特異性抗原受體，使NK細(xì)胞靶向識(shí)別和破壞腫瘤細(xì)胞。一些研究表明，NK細(xì)胞比ADCC具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒作用。

在car的應(yīng)用中，NK細(xì)胞優(yōu)于T細(xì)胞

異基因NK細(xì)胞不會(huì)引起GVHD，已經(jīng)在許多臨床試驗(yàn)中得到證實(shí)。

NK細(xì)胞不分泌引起細(xì)胞因子釋放綜合征的炎癥因子，如IL-1和IL-6。

除了car介導(dǎo)的靶向殺傷外，car-nk細(xì)胞還可以通過(guò)nk細(xì)胞的抗腫瘤特性識(shí)別和殺傷car靶向下調(diào)或缺失的腫瘤細(xì)胞，從而提高免疫治療效果。

異基因NK細(xì)胞來(lái)源廣泛，包括外周血、NK細(xì)胞系、臍血、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞、NK-92細(xì)胞系等。

目前，關(guān)于car-nk的臨床試驗(yàn)很多，大多集中在血液腫瘤的研究上，試圖解決car-t不能解決實(shí)體瘤的問(wèn)題。在實(shí)體瘤的治療中，研究人員開(kāi)發(fā)了多種靶向腫瘤相關(guān)抗原的car-nk細(xì)胞，如gD2、EGFR和PSCA。CAR修飾的NK細(xì)胞對(duì)表達(dá)相應(yīng)抗原的靶細(xì)胞具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒作用。其中以NKG2D為胞外結(jié)構(gòu)域的汽車結(jié)構(gòu)最為特殊。NKG2D可與多種腫瘤表面配體結(jié)合，具有廣譜抗癌作用。nkg2d-dap10-cd3ζ構(gòu)建的car-nk細(xì)胞對(duì)骨肉瘤、前列腺癌、橫紋肌瘤等腫瘤具有良好的殺傷作用。

綜上所述，我們可以總結(jié)出下圖來(lái)發(fā)展一系列NK細(xì)胞免疫治療癌癥的方法。

？？NK細(xì)胞電位治療方法示意圖

后記

一般來(lái)說(shuō)，有三種方法可以使用NK來(lái)對(duì)抗腫瘤：激活NK細(xì)胞，減輕NK細(xì)胞的免疫抑制，并控制NK細(xì)胞毒性。

NK細(xì)胞作為僅次于T細(xì)胞的第二大免疫細(xì)胞，在腫瘤治療中有著特殊的地位。雖然NK細(xì)胞療法的發(fā)展可以參考現(xiàn)有的T細(xì)胞治療，但也應(yīng)該注意到這兩種免疫細(xì)胞具有不同的作用機(jī)制。為了真正發(fā)揮NK細(xì)胞的抗癌作用，需要對(duì)其分子特性和功能進(jìn)行進(jìn)一步的探索和驗(yàn)證。